微流控流式細(xì)胞儀作為細(xì)胞分析領(lǐng)域的革新性工具,其核心技術(shù)貫穿流體操控、光學(xué)檢測與信號處理全鏈條,通過微米級流體通道與高精度檢測系統(tǒng)的協(xié)同,實現(xiàn)了對單細(xì)胞的快速、精準(zhǔn)分析。
流體操控技術(shù)是微流控流式細(xì)胞儀的基礎(chǔ)。其核心在于利用微米級通道的流體動力學(xué)特性,通過鞘液包裹與流速差控制,將細(xì)胞懸液聚焦成單細(xì)胞流。例如,微毛細(xì)管技術(shù)通過負(fù)壓區(qū)形成穩(wěn)定的單細(xì)胞上行流,確保每個細(xì)胞獨(dú)立通過檢測區(qū)域,最小樣本量可低至1000個細(xì)胞,且運(yùn)行8小時僅產(chǎn)生50ml廢液。此外,聲電泳(AP)、介電泳(DEP)等主動聚焦技術(shù)進(jìn)一步提升了細(xì)胞排列的精確性,為后續(xù)檢測提供穩(wěn)定信號源。
光學(xué)檢測系統(tǒng)是細(xì)胞信息獲取的關(guān)鍵。激光束垂直照射單細(xì)胞流,產(chǎn)生前向散射光(FSC)和側(cè)向散射光(SSC),分別反映細(xì)胞大小和內(nèi)部顆粒度。例如,低SSC信號可區(qū)分淋巴細(xì)胞與高SSC的粒細(xì)胞。同時,系統(tǒng)集成多色熒光檢測模塊,通過帶通濾光片(如690/50nm)精準(zhǔn)匹配熒光染料激發(fā)/發(fā)射光譜,結(jié)合光電倍增管(PMT)或CMOS傳感器,實現(xiàn)多參數(shù)同步檢測,單細(xì)胞分析參數(shù)可達(dá)數(shù)十個。
信號處理與分析技術(shù)則賦予儀器智能化決策能力。芯片上集成的電子系統(tǒng)對散射光和熒光信號進(jìn)行實時放大與模數(shù)轉(zhuǎn)換,通過阻抗相位角-振幅散點(diǎn)圖區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞,或利用深度學(xué)習(xí)算法自動化識別細(xì)胞亞群。例如,在癌癥診斷中,系統(tǒng)可高通量檢測循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC),并通過阻抗數(shù)據(jù)快速量化腫瘤細(xì)胞活性,為治療提供依據(jù)。
這些核心技術(shù)的融合,使微流控流式細(xì)胞儀在稀有細(xì)胞檢測、床旁診斷及資源有限地區(qū)推廣中展現(xiàn)出優(yōu)勢,成為精準(zhǔn)醫(yī)療與生物醫(yī)學(xué)研究的重要工具。